Как контролировать загрязнение медицинской лаборатории

В медицинской лаборатории риск заражения клеточных культур неизмерим — как бы аккуратно ни выполнялась работа. Просчет риска, безусловно, не является чем-то неслыханным, и загрязнение часто приводит к культурным потерям. Поэтому в этом блоге мы хотим пролить свет на то, как систематически выявлять и избегать контаминации клеточных линий.

Каждая медицинская лаборатория находится под угрозой изо дня в день
Микробное заражение клеточных культур, в том числе приобретенных у третьих лиц, в лабораториях не редкость. На самом деле все наоборот: многие клеточные линии, выращенные в лаборатории, заражены микоплазмой. Крошечные грибковые споры прячутся повсюду и могут переноситься по воздуху. Конечно, при работе в стерильной среде возможны человеческие ошибки. Легко сделать ошибки.

Ужасные сценарии в лабораториях клеточных культур - различные типы загрязнения:
микробное загрязнение (бактерии, микоплазма, грибки, дрожжи и т. д.)
вирусное загрязнение
белковое загрязнение (прион)
химическое загрязнение (вымываемые и экстрагируемые вещества из пластика, тяжелые металлы и т. д.)
кросс- загрязнение другими культурами клеток
Откуда происходит загрязнение?
1. Насколько «чистой» была первобытная культура?

Проблемы обычно начинаются с исходного материала. Даже при максимальных усилиях по производству сред некоторые материалы не могут быть полностью стерильными. Поэтому всегда есть риск проскока микоплазмы через стерильный фильтр. Прионы могут выжить даже при стерилизации паром при температуре 121 °C.

2. Действительно ли рабочая лаборатория представляет собой стерильную среду?

Одной из основных причин лабораторного загрязнения является человеческий организм. Например, многих перекрестных загрязнений можно избежать, если лаборанты избегают одновременной работы на нескольких производственных линиях на стерильном столе. Одна культура может быстро заразить другую, если с жидкостью не обращаться должным образом.

Кроме того, спешка — злейший враг стерильной работы. Дверцу CO2-инкубатора нельзя оставлять открытой без причины, особенно на длительное время. Лаборанты должны работать только с одной клеточной линией за раз, независимо от того, насколько сильно они ограничены во времени. При распаковке одноразовых пипеток под столом после того, как крышка отвинчена, ее необходимо отложить в сторону — ключевое слово: Надлежащая лабораторная практика (GLP).
Для получения дополнительной информации прочитайте нашу запись в блоге: «Пять интересных приложений для инкубаторов CO2».

3. Используете ли вы подходящее лабораторное оборудование?

Конечно, вполне возможно, что даже оборудование, используемое в медицинских лабораториях, может привести к заражению клеточных культур. Поэтому мы рекомендуем:

Использовать пластиковые контейнеры без пластификаторов
. Выбрать правильное место для инкубатора плесени (расположение вблизи умывальника может привести к загрязнению мылом)
. Использовать аксессуары для инкубатора, изготовленные из биоцидной меди.
При использовании антибиотиков следует время от времени культивировать штаммы, не содержащие антибиотиков . . (Это связано с тем, что антибиотики маскируют загрязнение, и инфекция может распространяться.)
Какие методы исследования можно использовать для отслеживания инфекций?
Самое опасное в микоплазменных инфекциях то, что они часто остаются незамеченными в течение длительного периода времени. В принципе, события загрязнения можно контролировать и отслеживать различными способами, некоторые из которых очень сложны, а другие — менее сложными.

Опытные лаборанты могут определить, произошло ли перекрестное загрязнение, просто взглянув в микроскоп.
Если выделить всю ДНК из клеточной культуры, то содержание в ней ДНК микоплазмы можно обнаружить с помощью методов ПЦР.
Лаборатории, выполняющие трансдукцию вируса или биологические анализы, также должны проверять наличие вирусного загрязнения.
Лаборатории, производящие лекарства для новых методов лечения, должны проверять наличие бактерий, спор, грибков, микоплазмы, ВИЧ, ВГС и ГЭКРС низкого риска.
Как бороться с загрязнением?
Каждый случай загрязнения должен быть зарегистрирован и классифицирован. По крайней мере, медицинские лаборатории, скрывающие свои проблемы с загрязнением, рискуют своей хорошей репутацией.

Разумеется, в случае загрязнения необходимо также принимать специальные меры по очистке: в случае грибковых поражений желательно проверить, проводится ли регулярная дезинфекция лаборатории спиртосодержащими реагентами
. протирка-дезинфекция внутренней части инкубатора спиртосодержащими реагентами поможет избежать заражения
Ежемесячная дезинфекция горячим воздухом является стандартной медицинской практикой во многих лабораториях
. В случае чувствительных стволовых клеток инфицированные клеточные линии можно лечить антибиотиками только в редких случаях. В большинстве случаев решение оказывается дорогостоящим – культуру приходится утилизировать и начинать работу с нуля.

В заключение:
Возможность постоянно обнаруживать, проверять и устранять загрязнения является абсолютной необходимостью, особенно в медицинских лабораториях, которые используют высокочувствительные стволовые клетки и не используют антибиотики. Прозрачный мониторинг имеет решающее значение. Сокрытие загрязнения или возможность его распространения только увеличивает опасность и в этом нет необходимости. Инкубатор всегда должен быть самым безопасным компонентом на всех этапах процесса; если образец загрязнен, в большинстве случаев это происходит до или после инкубационной культуры. Лабораторные инкубаторы применяются в разных областях

в зависимости от диапазона температурного контроля . Чембер есть биохимический инкубатор, широко используемый для исследовательских и производственных отделов, таких как охрана окружающей среды, санитария и профилактика эпидемий, сельское хозяйство, животноводство и водные продукты, тестирование лекарств, клеточные культуры и т. д.